El proceso de síntesis de oligonucleótidos
El proceso específico de síntesis de fase sólida de oligonucleótidos consta de cuatro ciclos: detriilación, acoplamiento, oxidación y limitación, y un ciclo genera un nuevo nucleótido.
1. Detritylation
La primera reacción, la detriilación, elimina un grupo que protege 5'-dimetoxytrityl del nucleósido unido al soporte.
2.Copling
La segunda reacción implica acoplar el monómero de fosforamidita apropiado (A, C, G o T) mezclado con un activador.
3. oxidación/tiolación
El enlace intermeducleótido de trieste de fosfito recién formado se convierte en el fosforotioato o fosfodiéster correspondiente con un reactivo tiolante u oxidación, respectivamente.
4.Capped
El paso final en el ciclo de síntesis es limitar los grupos 5'-hidroxilo no reaccionados.
Aplicaciones
• Drogas oligonucleótidos
• Cebadores de secuenciación de ADN y sondas de hibridación
• Síntesis de ácidos nucleicos antisentido
• Síntesis de ARN
Características técnicas
Los ST se pueden usar para sintetizar la escala de 50 μmol a 9 mmol.
Los sintetizadores de oligonucleótidos de Truesynt ofrecen:
• Flexibilidad en métodos de síntesis, química y escala
-Anigonucleótidos de ADN de fosfodiéster y/o fosforotioato, oligonucleótidos de ARN
• Buena síntesis de la economía
- Bajo consumo de Amidita
- genera significativamente menos desechos
- Recirculación de soluciones de monómero
• Alto rendimiento
- El tiempo de ciclo para una síntesis de 1 µmol es inferior a 5 minutos
• Método simple de exploración y escala
- Síntesis de hasta siete oligonucleótidos secuencialmente
-La escala de método simple sin optimización de métodos adicionales
- Estación de trabajo de cromatografía STS transparente a escala
• Monitoreo en línea para la tecnología analítica de procesos (PAT)
- Conductividad, UV-VIS y Presión
