En la purificación de proteínas y anticuerpos, cómo localizar con precisión las muestras objetivo es un parámetro importante que debe considerarse en el proceso experimental. Cómo elegir la longitud de onda de absorción adecuada está relacionado con el éxito de nuestro experimento de separación y también es la base para nuestro diseño del plan experimental.
Se sabe que la absorción ultravioleta del ganado que poseen las proteínas proviene de Aminoácidos aromáticos como el ácido tricolor y la tirosina, que contienen dobles enlaces conjugados en la molécula y tienen el pico máximo de absorción de luz cerca de la longitud de onda de 280 nm. Debido a que la mayoría de las proteínas contienen residuos de tirosina y triptófano, la medición de la Absorbancia de las proteínas a 280 nm es una de las formas más rápidas de analizar el contenido de proteínas en la solución.
Sin embargo, algunas proteínas tienen residuos de Aminoácidos aromáticos escasos o no expuestos, por lo que tienen una absorción débil a 280 nm. Además de las proteínas, otras biomoléculas también tienen absorción espectral.
A continuación enumeraremos algunas longitudes de onda comunes de monitoreo de separación de muestras biológicas como referencia de separación:
Detection Wavelength（nm） | Sample Type |
214 | Peptide samples, as well as partial protein samples containing peptide bonds |
230 | Organic mixtures as well as chaotropic salts |
260 | DNA/RNA |
280 | Aromatic amino acid residues (tryptophan, tyrosine, and phenylalanine) |
390/420 | coenzyme |
490 | GFP（Green fluorescent protein） |
600 | Protein aggregates |
El sistema de purificación de proteínas yocell tiene detectores ultravioleta de varios tamaños. La longitud de onda fija puede detectar la separación de los componentes objetivo en tiempo real, y la longitud de onda múltiple variable puede observar tanto las proteínas objetivo como las impurezas clave para satisfacer su elección de determinación de longitud de onda durante el experimento.
Detector model | Detector name | Wavelength range | Note |
F1 | Fixed single wavelength detector | default wavelength: 280nm | If necessary, the wavelength value can be changed |
F2 | Fixed dual wavelengths detector | default wavelength: 260/280nm |
V2 | Dual channel variable wavelength detector | 200-400nm | Detect 2 wavelengths at the same time |
V4 | Qual channel variable wavelength detector | 200-400nm | Detect 4 wavelengths at the same time |
V6 | Qual channel variable wavelength detector | 200-600nm |
V8 | Qual channel variable wavelength detector | 190-840nm |
